簡介：華中農業大學碩士學位論文豬SCAP和INSIG家族基因的克隆、染色體定位及生物學特征研究姓名邱歡申請學位級別碩士專業生物化學與分子生物學指導教師楊在清20050601GL“SCAP和刀礎家族|。因的克糜、染色體定位A生糖掌特征研J02獲得了1295BP包含一個675BP全長編碼區的INSIG2CDNA。豬INSIG2序列所編碼的INSIG2蛋白序列和人INSIG2有991％的同源性。RTPCR檢測表明INSIG2在心臟，腦，脾臟，肺，肝臟，肌肉，腎臟，睪丸，腸，脂肪組織中均有表達。此外，本研究首次分離并且鑒定了一個具有轉錄活性的INSLG2擬基因。該擬基因與INSIG2功能基因有96O％的序列同源性，不含內含子序列，序列中含有多個堿基突變和缺失，其3’末端帶有一個POLYA尾。對人、大鼠和小鼠全基因組數據庫的檢索和對猴類來源的DNA進行的PCR檢測表明，該擬基因特異存在于豬基因組中。3獲得了4045BP包含一個3870BP編碼區的SCAP全長CDNA。豬SCAP序列所編碼的SCAP蛋白序列和人SCAP有922％的同源性。RTPCR檢測表明SCAP在肝臟，肺，腎臟，睪丸，腸，腦，肌肉和脂肪組織中均有表達?；蚪Y構分析表明，豬SCAP全長大于10KB，由18個外顯子和17個內含子組成。與人、小鼠和大鼠的SCAP基因相比較發現，豬SCAP基因的內含子有丟失的現象。此外，本研究首次分離得到了兩種SCAP差異剪接體。這兩種SCAP差異剪接體分別由野生型SCAPSCAPVARIANT1發生193BPSCZEVARIANT21和291BPSCAVARIANT31的讀碼框內缺失所造成。RTPCR分析表明，SCAPVARIANT2在肝臟和肌肉中特異表達，而SCAPVARIANT3在睪丸中特異表達。對人、大鼠和小鼠EST數據庫的檢索和對小鼠來源的RNA進行的RTPCR檢測表明，SCAP的差異剪接現象在人、大鼠和小鼠中沒有發生。4通過輻射雜交板技術，本研究將豬1NSLGL、INSIG2、INSIG2擬基因和S翻P分別定位于豬染色體的18Q2123、15Q1415、7Q21一Q23以及13Q2122區域。結論1豬的INSIGL、1NSIG2和SCAP與其它物種來源的對應的基因有很高的同源性。2豬的INSIGL存在差異剪接體，該基因的差異剪接現象在各物種問沒有保守性。3豬基因組中第7號染色體上存在一個具有物種特異性的INSIG2擬基因。4豬SCAP有兩種差異剪接體，該基因的差異剪接現象特異性的發生在豬中。5豬SCAP基因在進化過程中發生了內含子的丟失現象。61NSIGL、INSIG2和SCAP的定位結果與人／豬比較基因圖譜相對應，進一步證實了4

簡介：分類號密級弋目差≮夭等博士學位論文V773508單位代碼10019學號B02186草地生態系統價值評估及其動態模擬THEVALUATIONANDITSDYNAMICMODELLINGOF研指THEGRASSLANDECOSYSTEMS冗生遵遺導教師鹽建墾絲攫合作指導教師送纏曾熬援申請學位門類級別筮堂擅稱蔓業抖堂向塋絲生盔堂院麴塑丑堂堇盔坐瞳2005年5月本論文由“下項目資助完成L、“I一五”國家科技攻關項目課題“巾國草業發展戰略研究”；2、“十五”國家科技攻關壩目諜題。草地植被恢復重建關鍵技術研究與示范”名方學業究在專研所ABSTRACTTHEVALUATIONOFECOSYSTEMSHASBECOMEAHOTISSUEINTHEPROTECTIONOFTHEGLOBALENVIRONMENT，HOWEVER，HOWTOEVALUATETHEVALUESANDDYNAMICSOFRANGELANDECOSYSTEMSISABASICTHEORETICALPROBLEMOFTHEHOTISSUETOBESOLVEDWITHTHEFISTPRIORITYANDHASNOWATTRACTEDUNIVERSALATTENTIONALLOVERTHEWORLDTHEINTEGRATEDSTUDIESOFTHEVALUATIONANDITSDYNAMICMODELINGOFTHERANGELANDECOSYSTEMSHAVEINVOLVEDINTHEORIESANDMETHODOLOGIESOFBOTANYRESTORATIONECOLOGYSYSTEMSECOLOGYECOLOGICALECONOMICSETC，SOTHISDISSERTATIONREVIEWEDTHELATELYTHEORETICALDEVELOPMENTSOFRELATEDRESEARCHFIELDSONTHEBASISOFSYSTEMATICANALYSESANDSUMMARIZATIONOFTHEPREVIOUSANDPRESENTRESEARCHESONECOSYSTEMSRESTORATION，ECOLOGICALECONOMICVALUATION，THEFOUNDATIONALTHEORETICALFIAMEWORKPRESENTEDFORSTUDYINGTHEVALUESANDTHEIRDYNAMICSOFTHERANGELANDECOSYSTEMSINORDERTOEVALUATEANDDEMONSTRATETHEPOTENTIALOFVALUESOFRANGELANDECOSYSTEMSTHROUGHCASESTUDYTHISDISSERTATIONFOCUSONTHEMNGELANDECOSYSTEMSINSHILINGAOLE，INNERMONGONIASOMECOMBINEDVALUATIONTECHNIQUESINCLUDINGTRADITIONALANDLATELYDEVELOPEDVALUATIONMETHODOLOGYAREAPPLIEDTOTHEDISSORTATIONTHEMAINRESEARCHEFFORTSANDCOUCTUSIONSASFOLLOV／A1ANALYZEDANDEXPLOREDTHEORETICALFRAMEWORK，TYPES，EXAMPLESANDEXISTINGPROBLEMSRELATEDTOVALUATIONOFNATURALCAPITAL，ECOSYSTEMSERVICESANDENVIRONMENT，STUDIEDTHEBACKGROUNDS，STRATEGIESANDTYPESOFECOSYSTEMRESTORATIONRESEARCHES，ANDDISCUSSEDTHEPERSPECTIVESANDDIRECTIONSOFVALUATIONOFRANGELANDECOSYSTEMS2THEDETAILEDFRAMEWORKANDCOMPONENTSFORSTUDYINGTHEDYNAMICSANDVALUATIONOFTHERANGELANDECOSYSTEMSWEREESTABUSHED，WHICHAREVERYHELP‘FULFORDECISIONMAKINGANDMEASUREDYNAMICVALUESOFRANGELANDECOSYSTEMMANYDEVELOPMENTDECISIONSAREMADEONECONOMICGROUNDSBYPROVIDINGAMEANSFORMEASURINGANDCOMPARINGTHEVARIOUSBENEFITSOFRANGELAND，ECONOMICVALUATIONCANBEPOWERFULTOOLSTOAIDANDIMPROVEWISEUSEANDMANAGEMENTOFTHERANGELANDINTHEPAST，RANGELANDHAVEBEENUNDERVALUEDBECAUSEMANYOFTHEECOLOGICALSERVICES，BIOLOGICALRESOURCESANDAMENITYVALUESTHEYPROVIDEARENOTBOUGHTANDSOLDANDHENCEAREDIFFICULTTOPRICETHENEWFRAMEWORKCONSISTSOF4COMPONENTS1VALUATIONOFECOLOGICALCAPITAL；2VALUATIONOFECOSYSTEMFUNCTIONSANDSERVICES；3VAINATIONANDITSDYNAMICMODELINGOFPROCESSESOFECOSYSTEMRESTORATION；4MANAGEMENTSUGGESTIONSTHEDISSERTATIONPRESENTEDANEWVALUATIONFRAMEWORKOFECOLOGICALECONOMICSYSTEMSCOMBINEDDYNAMICMODELING，PROCESSANALYSIS，ANDMANAGEMENTRESEARCHESTOGETHERWHICHISVERYUSEFULFORDECISIONMAKINGOFECOLOGICALINVESTMENT3THEDISSERTATIONUSESANALTERNATIVEMEASUREOFVALUE，BASEDONREALCONTRIBUTIONSTOSYSTEMPERFORMANCE，TERMEDEMEFGGSPELLEDWITHAN“M”ITISANEWCONCE“WHICHQUANTIFIES”ENERGYMEMORY”INPRODUCTSANDPROCESSITISANACCOUNTINGUNITOFTOTALCONTRIBUTIONS，DIRECTANDINDIRECTUSEDINGENERATIONOFAPRODUCTORSERVICEITISACONCEPTDERIVEDFIOMUNDERSTANDINGWHOLESYSTEMS，THEIRINTERACTIONSANDINTERDEPENDENCE，ANDTHERESOURCESDRIVINGANDMAINTAININGTHEMTHISBROADERAPPROACHCOULDHELPUSTOINVESTIGATERESOURCESUTILIZATIONANDPOTENTIALITIESANDEXCHANGEINECOCCONOMICSYSTEMINTHEPROCESSOFDEVELOPINGAMOLEQUANTITATIVEAPPROACHTOASSESSINGTHEVALUESⅡ

簡介：本實驗通過改變以下試驗條件卵母細胞體外成熟時間的不同、卵母細胞去核時操作液成分的不同，來研究其對山羊核移植效率的影響，希冀尋找一個有效的核移植方案。1、將山羊卵母細胞經過不同的體外成熟時間后18H、22H、26H，比較其成熟率發現，經三種成熟時間的卵母細胞成熟率差異不顯著。將這三種情況下的卵母細胞去核后，比較其去核率時發現，隨卵母細胞成熟時間的延長去核率下降871％，844％，765％。但是對核移植胚的體外發育情況進行進一步研究發現，18H時的卵裂率718％明顯低于22H和26H811％，825％；22H時的囊胚率196％高于18H和26H時的囊胚率125％，157％。所以，卵母細胞體外成熟時間以22H左右為宜。2、本研究比較了判斷山羊卵母細胞去核效果的指標將具有第一極體的卵母細胞放入含細胞松弛素BCYTOCHALASINB，CCB濃度分別為5MGL、75MGL、10MGL、15MGL的操作液中盲吸去核，經熒光染色后檢測去核率，再構建重組胚觀察重組胚的發育情況；在含75MGLCCB的操作液中分別再加入質量濃度為2％、25％、3％的蔗糖進行去核，再用相同方法確定去核率，再構建重組胚觀察重組胚情況。結果CCB濃度為75MGL時，去核成功率844％明顯高于對照組707％，也高于其他各組；平均操作時間隨CCB濃度的升高而降低；含CCB濃度為75MGL與5MGL的操作液去核卵母細胞所構建的重組胚卵裂率811％、824％顯著高于對照組和15MGL的卵裂率698％、718％；含CCB濃度為75MGL與5MGL的操作液去核卵母細胞所構建的重組胚囊胚率196％、188％顯著高于對照組的囊胚率95％。蔗糖質量濃度為25％時的去核成功率914％明顯高于對照組844％；平均操作時間隨蔗糖質量濃度的升高而降低。結論去核時在如下條件下，可以取得最佳去核效率1去核時操作液中CCB濃度75MGL；2操作液中蔗糖質量濃度為25％。

簡介：華中農業大學碩士學位論文豬ADFP基因的克隆、染色體定位及其生物學功能研究姓名趙雪蓮申請學位級別碩士專業生物化學與分子生物學指導教師楊在清20050601華中農業大學生命科學技術學院碩士學位論文縮略語表ADFPADIPOSEDIFFERENTIATIONRELATEDPROTEINAMPAMPICILINBPBASEPAIRDNTPDEOXYNUCLEOCIDETRIPHOSPHATEDNADEOXYRIBOMUCLEICACIDDEPCDIELHYLPYROCARBONATEDTTDJTHJOOTHREILOLEBETHIDIUMBROMIDEECOLIESCHRERICHIDCOLIGSTGLUTATHIONESTRANSFRERASEHRPHORSERADISHPEROXIDASELGGIMMUNOGLOBULINGIMPRH1NKAUMNPORCINERADIATIONHYBRIDIPTGISOPROPYLTHIOBDGALACTOPYRANOSIDEKDAKILODALTONKANKANAMYCINODOPTICALDENSITYORFOPENREADINGFRAMEPAGEPOLYACRYLAMIDEGELELECTROPHORESISPBSPHOSPHATEBUFFEREDSALINEPMSFPHENYLMETHYLSULPHONYLFLUORIDERNARIBONUCLEICACIDRNASERIBONUCLEASERTPCRREVERETRANSCRIPTIONPCRTBETRISBORATEEDTABUFFERTETRIS／EDTABUFFERTEMEDN，N，N，N，TETRAMETHYLETHYLENEDIAMINETRISTRIHYDROXYMETHYLEAMINOMMETHANESDSSODIUMDODECYLSULFATESINESHORTINTERSPERSEDNUCLEARELEMENTWBWESTERNBLOTXGAL5BROMO4一CHLORO一3一LNDOLYL一13一DGALACTOPYRANOSIDE9

簡介：東北農業大學碩士學位論文羊痘病毒P32基因的克隆與表達姓名郭巍申請學位級別碩士專業預防獸醫學指導教師李一經20041101CLONGINGANDEXPRESSIONOFCAPRIPOXVIRUSP32GENEABSTRACTCAPRIPOXVIRUSCPVWASTHEAGENTOFGOATANDSHEEPPOXDISEASETHECPVSTRUCTURALPROTEINP32WASSPECIFICTOCPVANDHASAMAJORANTIGENICDETERMINANT，SEQUENCEOFP32GENEISALSOCONSERVEDTOCPVGENOMEDIAGNOSISOFCPVINFECTIONSHOULDBEBASEDONTHESTUDYOFP32PROTEINPAIRSOFPRIMERSWEREDESIGNEDWITHPRIMER50ACCORDINGTOGOATPOXVIRUSGTPVP32SEQUENCEPUBLISHEDINGENBANKTHETEMPLETDNAWASSEPARATEDFROMSCABSOFWILDCPVINFECTEDGOATANDSHEEPANDALSNFROMENLTURESOFCPVVACCINEINFECTEDFETALGOATDERMALCE兒SFGDCPVDNAFRAGMENTSNEARLYLKBWEREAMPLIFIEDBYPCR，ANDTHEYWEREINSERTEDINTOVECTORPMDL8TANDSEQUENCEDTHERESULTSOFSEQUENCINGSHOWTHATGTPVP32GENEWAS969BPANDENCODE323AMINOACIDS，SHEEPPOXVIRUSSPPVP32GENEWAS972BPANDENCODE324AMINOAEIDSFGDCPVP32GENEWAS969BPANDENCODE323AMINOACIDSTHESEQUENCESWERECOMPAREDTOP32GENESPUBLISHEDIAGENBANKTHERESULTSSHOWTHATTHEIDENTITYBETWEENP32GENESISHIGHENOUGHTOIMPROVETHATCPVP32GENEWASCONSERVEDINCPVGENOMETHEFULLIENGTHP32GENEWASCLONEDINTOBACTOBACBACULOVIRUSEXPRESSIONSYSTEMANDECOLIEXPRESSIONSYSTEMTHERECOMBINANTEXPRESSINGVEEL；ORSWERECONSTRUCTEDBACBACL一P32ANDBACBACHTAP32WERETRANSFECTEDSF9CELLS、PPROP32WASTRANSFECTED￡COLINOTARGETEDPROTEINSWEREEXPRESSEDTHESMALLERTRUNCATEDP32FRAGMENTWITHOUTTHETRANSMEMBRANEREGIONOFP32WASAMPLIFIEDBYPCRANDTHE叵COLIEXPRESSIONVECTORPPRPTRUNCP32WASCONSTRUCTEDAFUSIOMPROTEINNEARLY31KDAWOSEXPRESSEDBYIPTGINDUCEDBL2LDE3THISASSAYPROVIDEDBASISFORTHEESTABISHMENTOFRAPIDANDAVAILABLEGOATANDSHEEPPOXDIAGNOSISMETHODSANDFORTHESTUDYOFCPVMOLECULARPROPERTIESCANDIDATEGUOWEISPECIALITYPREVENTIVEVETERINARYSCIENCESUPERVISORPROF，LIYIJINSKEYWORDSCAPRIPOXVIRUSP32GENECLONINGEXPRESSIONVI

簡介：813“2碩士學位論文學校代碼10193編號2005．S069分類號853密級無吉林白鵝肉用品系主要產肉性能的ISSR分子標記研究作者孫永峰專業名稱動物遺傳育種與繁殖研究方向分子遺傳與禽類育種指導教師吳偉教授吉林農業大學二00五年六月吉林農業大學碩士學位論文吉林白鵝肉用品系主要產肉性能的ISSR分子標記研究ABSTRACTTHISEXPERIMENTWASCARDEDOUTTOSTUDYTHERELATIONSHIPOFISSRMOLECULARGENETICMARKERSANDTHEMARKERSOFTHEMEATTRAITSINSAMPLEASWELLASTHISTECHNIQUEUSINGINTHEANIMALBREEDING．BLOODSAMPLESFORDNAEXTRACTIONWEREOBTAINEDFROMJILINWHITEGEESEATTHEAGEOF70DAYS．THERESULTSASFOLLOWSLAUGHTERRATIO84％，HALFNETTHORAXWEIGHTRATIO90．0％，WHOLENETTHORAXWEIGHTRATIO80．2％OFJILINWHITEGEESEATTHEAGEOF70DAYS．FOURISSRPRIMERSWERESELECTEDANAMPLIFIEDINISSRANALYSISINGENOMICDNAOF30JILINWHITEGOOSEINDIVIDUALS．AND302SPECIFICBANDS31．4％1DISTILBUTEDIN24INDIVIDUALSWEREOBTAINED．STUDYSHOWEDTHAT4PRIMERSAK89、AK91、AK92ANDAK93COULDBEUSEDINTHEMARKERSTUDYOFTHEGOOSESLAUGHTERTRAITS．ABOUTANALYSEOFSLAUGHTERBODYWEIGHTTRAIT，WEHADIDENTIFIEDTHECOMBINEDBANDPATTERNABQBGWITHAK99PRIMER,THECOMBINEDBANDPATTERNC，ABANDGHJKWITHAK91PRIMER,THEBANDPATTERNWITHAK92PRIMER,THEBANDPATTEMA，DWITHAK93PRIMERASTHESUPERIORITYCOMBINEDBANDPATTERNTOTHEBODYWEIGHTINGOOSE．WEHADIDENTIFIEDTHEA，BBANDSWITHAK89PRIMET,B．GBANDS謝N1AK91PRIMER,G，HBANDS、捌THAK92PRIMER,ABANDSWITHAK93PRIMERCOULDBEVIEWEDASTHEDOMINANTBANDSTOTHESLAUGHTERWEIGHTTRAITS；THEREINTO，THEB。GBANDSWITHAK91PRIMER,THEGBANDSWITHAK92PRIMETWERETHEBANDSLINKEDTOTHEMEATTRAITSINJILINWHITEGOOSE．ABOUTANALYSEOFWHOLENETTHORAXWEIGHTTRAIT，WEHADIDENTIFIEDTHECOMBINEDBAND．PATTEMABGBGGHANDBGLWITHAK89PRIMER,THECOMBINEDBANDPATTERNC，AB，GHJKWITHAK91PRIMER,THECOMBINEDBANDPATTERNA，AEGHWITHAK92PRIMER,THECOMBINEDBAND．PATTERND1WITHAK93PRIMERASTHESUPERIORITYBANDSTOTHEBODYWEIGHTINGOOSE．WEHADIDENTIFIEDTHEA，BBANDSWITHAK89PRIMER,B，G，IBANDSWITHAK91PRIMER,A，E，HBANDSWITHAK92PRIMER，A，IBANDSWITHAK93PRIMERCOULDBEVIEWEDASTHEDOMINANTBANDSTOTHESLAUGHTERWEIGHTTRAITS；THEREINTO，THEABANDWITHAK89PRIMER,BBANDWITHAK91PRIMER,ABANDWITLLAK92PRIMER,ABANDWITHAK93PRIMERWERETHEBANDSLINKEDTOTHEWHOLENETTHORAXWEIGHTTRAITSINJILINWHITEGOOSE．TTESTONTHEISSRAMPLIFIEDPRODUCTSOFGENOMICDNAPOLYMORPHISMINJILINWHITETL

簡介：CLASSIFIEDINDEXCONFIDENTIALYES／NONOCODE10224NO1009640DISSERTATIONFORTHEMASTERDEGREESTUDYONGRK2FUNCTIONINDAIRYCOWMAMMARYEPITHELIALCELLSCANDIDATEHUHONGLIUSUPERVISORPROFLIQINGZHANGDEGREECATEGORYMASTEROFSCIENCECOLLEGECOLLEGEOFLIFESCIENCESFIRSTLEVELDISCIPLINEBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGYSECONDLEVELDISCIPLINEANIMALBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGYHARBINCHINAJUNE2013東北農業大學理學碩士學位論文244實驗重復性分析19245CLEANTAG拷貝數分布統計19246基因表達注釋19247差異表達基因的篩選20248反義鏈轉錄分析20249新轉錄本的檢測202410GO功能顯著性富集分析202411PATHWAY顯著性富集分析2L25熒光定量RTPCR驗證21251基因選取及引物設計2L252CDNA的生成23253引物效果驗證23254實時熒光定量PCR反應一2526奶牛乳腺組織的獲取及上皮細胞的培養25261主要試劑及配制方法25262主要儀器26263用于細胞培養的乳腺組織的獲取26264乳腺上皮細胞的原代培養27265細胞傳代及純化27266乳腺上皮細胞鑒定2727功能基因的篩選28271GRK2在不同狀態的奶牛乳腺組織中的表達2828GRK2基因過表達檢驗基因功能28281引物設計及PCR擴增28282克隆載體構建30283PGCMV／IRES／EGFP真核表達載體構建32284重組質粒載體轉染奶牛乳腺上皮細胞34285轉染后熒光基團的檢測35286熒光定量RTPCR檢測GRK2過表達效果35287WESTERNBLOTTING檢測GRK2過表達對泌乳功能的影響3629GRK2基因沉默檢驗基因功能一39291主要試劑39292主要儀器40293細胞轉染40294干擾效率的觀察41295熒光定量RTPCR檢測GRK2沉默效果4LII

簡介：點擊查看更多檢測冠狀病毒基因芯片的研制及犬冠狀病毒膜蛋白和纖突蛋白基因的克隆.pdf精彩內容。

簡介：中國農業科學院碩士學位論文豬NRAMP1基因PCRRFLP多態性與免疫指標及生產性狀關系的研究姓名吳宏梅申請學位級別碩士專業動物遺傳育種與繁殖指導教師王立賢20050601ABSTRACTDISEASERESISTANCEISBECOMINGAMAINTARGETTRAITINBREEDINGFORLIVESTOCKSATPRESENTNRAMPINATURALRESISTANCEASSOCIATEDMACROPHAGEPROTEINPLAYSAKEYROLEINIRMATEIMMUNEDEFENCINGINFECTIONWITHINTRACELLULARPATHOGENSUCHASMYCOBAETERIUMANDSALMONELLAINTHISRESEARCHWESTUDIEDTHEASSOCIATIONOFPOLYMORPHISMSOFNRAMPLGANEWITHSOMEIMMTMETRAITSANDSOMEPRODUCTIONTRAITSINORDERTOANALYSEWHETHERTHEGONECOULDBEACANDIDATEGENEFORDISEASERESISTANCE1PCRRFLPANALYSISWASUSEDTODETECTTHEVARIATIONSWITHININTRON6OFTHEPORCINENRAMPLGONEON165LARGEWHITELWPIGSAND109ZHONGXUBLACKZBPIGSPOPULMIONWHICHWEREREAREDINTHESA／NECONDITIONSBOTHPOLYMORPHONUCLEARLEUKOCYTESPMNBYNITROBLUETETRAZOLIUMNBTREDUCTIONPNANDCYTOTOXICITYOFMONOCYTEMTWEREMEASUREDTHERESULTSSHOWEDTHATTHEREWASONENDELRESTRICTIONLOCUSWITHTHLEEGENOTYPESAA，BBANDAB，RESPECFIVELYINBOTHLWANDZBBREEDSTHEFREQUENCYOFGONEANDGENOTYPEWERESIMILARINTWOBREEDSTHEFREQUENCYOFGENOTYPEOFAAWASO006ABWAS0667ANDBBWAS0327INLW，ANDINZBBREEDTHE靠EQUENCYOFAAWSS0009，ABWAS0725ANDBBWAS0266RESPECTIVELYTHEFREQUENCYOFALLELEAWAS034ANDBWAS066INLWANDINZBBREEDTHEFREQUENCYOFALLELEAWASO372ANDBWAS06282ASSOCIATION0FNRAMPLGENEPOLYMORPHISMSWITHSOMEIMMUNETRAITSWEREANALYSEDDONEBYSASSOFTWAREANDTHERESULTSSHOWEDTHATTLEEFFECTOFINTERACTIONBETWEENBREEDSANDGENOTYPESHADVERYSIGNIFICANTONPNFPO01THEVALUEOFPNOFBBGENOTYPEWASHIGHERTHANABGENOTYPEF尸O01INLWBREED，HOWEVERINZHONGXUBLACKTHEVALUEOFPNOFABGENOTYPEWASHIGHERTHANBBGENOTYPEPO05CYTOTOXICITYOFMONOCYTEMTWASMEASUREDONLYINLWTHEVALUEOFMTOFBBGENOTYPEWASHIGHERTHANABGENOTYPEFP0053ASSOCIATIONANALYSISBETWEENNRAMPLGONEPOLYMORPHISMSANDIMMUNEANDPRODUCTIONTRAITSSHOWEDTHATTHEBREEDHADSIGNIFICANTEFFECTONTHEWEIGHTOFL80DAYSP005THEL80DAYSWEIGHTOFLWWASHIGHERTHANZBBREEDTHEINDIVIDUALSWEIGHTSOF180DAYSWITHDIFFERENTGENOTYPESINSAMEBREEDWERESIGNIFICANTDIFFERENT，BBGENOTYPEWASHIGHERTHANABGENOTYPECPO，05INLWBUTINZBTHE180DAYSWEIGHTSOFDIFFERENTGENOTYPESWERENOTSIGNIFICANTDIFFERENTP’O054ANALYSISOFTHEDEATHRATESHOWEDTBATTHEREWERENOSIGNIFICANTDIFFERENCESBETWEENTHETWOBREEDSANDDIFFERENTGANOTYPES∞WELLASTHEDEATHRATEOFDIFFERENTGENOTYPESINSAMEBREED，BUTTHEDEATHRATEOFBBGENOTYPEWASLOWERTHANABGENOTYPEINLWWHILEINZHONGXUBLACKTHEDEATHRATEOFABGENORYPEWASLOWERTHANBBGENOTYPEALLTHOSERESULTSINDICATEDTHATPOLYMORPHISMSOFNRAMPTGONEHADSIGNIFICANTEFFECTONTHEIMMUNETRAITSANDTHEPRODUCTIONTRAITSANDCOULDBETREATASACANDIDATEGENEOFDISEASERESISTANCEKEYWORDSPIG，NRAMPLGONE，PCRRFLRTHEIMMUNETRAITS，THEPRODUCTIONTRAITS

簡介：洳≥J～曾’碩士學位論文⑧、P77634；家蠶SCISB基因克隆及其原核表達的研究作者姓名韭堇指導教師韭攫潮數援專業學科生塑焦堂生僉壬生絲堂所在學院生僉盤堂堂瞳提交日期三鐾墨五生五月浙江大學中國杭州浙江大學碩士學位論文中文摘要根據NCBI已經報道的SCISB的MRNA序列，自行設計一對特異性引物，利用RTPCR擴增獲得SCISB的CDNA片段，將該片段連接到原核表達載體PGEX4T1中，經PCR、酶切鑒定以及測序分析，證實成功構建了重組表達載體PGEX4T1一SCISB。用已構建的重組表達載體轉化大腸桿菌BL21DE3，挑取陽性克隆培養，IPTG誘導后裂解菌作SDSPAGE分析，在34KD處有一特異性蛋白條帶，與預期值相符。表達量可達菌體總蛋白的15％左右。融合蛋白以包涵體的形式存在，超聲波裂解菌體分離包涵體并離心、洗滌；用20％SARKOSYL十二烷基肌氨酸鈉溶解包涵體，采用親和層析純化了融合蛋白GSTSCISB。胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶活性抑制實驗表明，該融合蛋白具有一定的胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶活性抑制作用。質譜分析表明，與RSCISB期望氨基酸序列基本一致，。以該融合蛋白為抗原免疫兩只雄性新西蘭大白兔制作了該重組蛋白的多克隆抗體，ELISA檢測該抗體血清的效價可達到15610416400以上。WESTERN印跡實驗呈陽性，進一步證實了重組蛋白的表達。關鍵詞家蠶；SCISB基因；原核表達；胰凝乳蛋白酶抑制劑；多克隆抗體

簡介：綿羊的繁殖性狀一般分為受胎率、多胎率及羔羊存活率三類性狀，繁殖性能的高低直接關系到養羊業生產成本和生產效率，具有重人的經濟意義。蒙古羊是我國最古老的地方綿羊品種之一，烏珠穆沁系蒙古羊是在當地生態環境條件下，經長期選育形成的一個優良類群，幾有許多優良特性，主要以抗病力強、產肉率高和繁殖性能高而聞名。為了揭示蒙古羊高繁殖性能，使蒙古羊這一寶貴資源能得到有效利用，本研究以烏珠穆沁系蒙古羊為實驗材料，前先以BMPRIB和FSHΒ基因作為蒙古羊高繁殖力候選基岡，對其進行了克隆及序列分析，并采用實時熒光定JPCRRQPCR的相對定量方法對BIUPRIB和FSH口基因在單羔蒙古羊非發情期、發情期及產雙羔蒙古羊懷孕后期的卵巢、子宮、輸卵管、下丘腦和垂體組織進行了差異表達研究；其次采用抑制性淌減雜交技術SSH塒經產譯、雙羔蒙古羊的卵巢組織差異表達基因進行了篩選并采用電子克隆加RTPCR方法對部分差異表達基因進行了克隆和驗證。通過以上研究，為提高我國肉用綿羊繁殖力及加快肉羊新品種選育提供了重要的理論依據，并獲得以下主要研究結果L采用RTPCR方法分別從蒙古羊卵巢組織中擴增出BMPRIB，FSHΒ基因的CDNA序列。蒙古羊BIWPRIB基因全長1567BP，包括完整的1509BP開放讀碼框（F），共編碼502個氨基酸。通過對單、多胎蒙古羊BMPRIB基岡測序結果分析發現，在單、多胎蒙古羊BMPRIB基因編碼區第746位和第1113位堿基相一致，分別為“A”和“C”，并沒有發生同多胎BOOOLA羊相同的AG突變和CA突變。蒙古羊FSHΒ基岡全長1021BP，包括完整的390BPF，共編碼129個氨基酸。2采用相對定量的雙標準曲線法建立了蒙古ΒACTIN、BMPRIB和FSHΒ基因的RQPCR反應體系。以非發情期單羔蒙古羊的卵巢組織定量結果為對照，計算得到FSHΒ基因在單羔蒙古羊發情期下丘腦組織中表達量最高，在發情期的輸卵管組織中表達量最低；BMPRIB基岡在單羔蒙古羊發情期卵巢組織中表達量最高，在發情期的子宮組織中表達量最低。在卵巢組織中，FSHΒ基因在發情期卵巢組織中的表達址是非發情期的131倍，雙羔羊是單羔羊的070倍；BMPRIB基岡在發情期卵巢組織中的表達量是非發情期的265倍，雙羔羊是單羔羊的216倍。證明BMPRIB基因是蒙古羊多胎主要候選基因，FSHΒ基因雖然在綿羊繁殖過程中具有重要的作用，但并非蒙古羊多胎主效基因，可能與多胎性狀的主基因或QTL相連鎖。3采用SSH技術成功構建了單、雙羔蒙古羊卵巢組織的正、反向消減CDNA文庫，并從兩個消減CDNA質粒文庫中篩選得到768個有效陽性克隆，插入片段長度主要分布于150～LOOOBP之間。結合斑點雜交技術獲得到差異克降373個，通過測序和同源性檢索獲得已知基因序列185條，10條己知的差異表達EST和4條未知的EST序列。4對差異表達基因功能分析表明，本實驗所獲得的基因主要由以下幾大類組成機體和細胞防御、免疫類14個，代謝類53個，物質運輸類20個，核酸修飾類12個，細胞發育類18個，信號傳導類12個，細胞結構類9個，未分類47個，其中代謝類基因占據了最大部分占2865％。將這些差異表達基因和已報道的與繁殖性狀相關的基岡比較發現，經過初步篩選得到12個差異表達基因與己報道的繁殖性狀相關基因相一致，這些基因分別為ITGB1、BMP6、WHCI、ACIRLI、IGFBP5、SPONI、ABP5、ADAMTS1、FAM46A、THYI、ARP3和ID3基因。5分別以SSH獲得的差異表達ADAMTS1和ID3基因序列片段為種子序列在綿羊的EST數據庫中進行BLASTN同源性檢索，得到相應的UNIGENE編號分別為OAR7453和OAR5068，經過序列拼接分別得到2418BP和1099BP的蒙古羊ADAMTSI、ID3基因電子克降CDNA序列。采用RTPCR方法實驗克降得到2420BP的蒙古羊ADAMTSI基因序列和1045BP的蒙古羊ID3基因序列，經同源性比對發現，實驗所得序列與電子延伸序列的同源件分別為994％和993％，并將序列提交至GENBANK獲得注冊號分別為GU437212和GU437213。

簡介：四川農業大學罩IIII士學位論文青海湖地區不同退化程度高寒草地植物量及光能轉化效率的研究指導麓師學科專業翻蝴向盔小利2嘲年5月～～～～量的凈生產量及周轉值分別為787139／M2A、2608％、119069／M2A、5133％。5地下與地上植物量的比值隨著草地退化程度加重而增大。針茅型中度與重度退化樣地地下與地上植物量的比值分別為1686、515L嵩草型中度與重度退化樣地地下與地上植物量的比值分別為2461、2722。6針茅型與嵩草型不同退樣地熱值測定表明，群落地上部分熱值大于地下部分，地上部分熱值含量以牧草生長旺盛期最高，返青期最低，枯黃期次之。并且其熱值含量均高于世界陸生植物的平均熱值，地上、地下、全群落能量積累與植物量增長呈顯著的線性正相關。7草地凈能空間分配率隨眚草地退化程度加重而減小。針茅型中度與重度退化樣地分別為01667、00439；嵩草型中度與重度退化樣地分別為02257、01049。8隨著草地退化程度的加重，植物群落地上部分對光能的轉化效率減弱。兩草地型對光能的轉化效率全群落，針茅型中度與重度退化樣地為O208％、0317％，湍草型中度與重度退化樣地為O216％、O259％；地上部分，針茅型中度與重度退化樣地分別為003％、O013％；嵩草型中度與重度退化樣地分別為O04％、0024％，地下部分。針茅型中度與重度退化樣地分別為0178％、O303％，嵩草型中度與重度退化樣地分別為0177％、0234％。關鍵詞高寒草地；草地退化；植物群落；熱值；能量積累；光能轉化效率

簡介：雞傳染性支氣管炎INFECTIOUSBRONCHITIS，IB是由傳染性支氣管炎病毒INFECTIOUSBRONCHITISVIRUS，IBV引起的一種急性高度接觸性傳染病。自30年代在美國爆發以來，現已成為世界各地流行的重要禽病。IBV是單股RNA病毒，該病毒基因可因點突變和重組而發生變異，故傳染性支氣管炎病毒血清型較多。已知的血清型有以侵害呼吸道為主的CONN、IOWA97、JMK、FLIDA、ARKANSAS99等和以侵害腎臟為主的M41、HOLTE、GRAY、AUSTRALIA“T”等30余種。GOUGH等GOUGHETAL，1992報道了英國一種新的793B血清型的IBV，該毒株和其它血清型傳支毒株之間無交叉血清學關系；其免疫原基因S1的序列與歐洲17個傳支毒株之間差異高達21～25％。目前，該血清型IBV在西班牙、德國、荷蘭、意大利、泰國等國均有發生和流行，對養雞業危害較大。2003年刁有祥、楊杰華等從山東省某蛋雞飼養場產蛋異常下降雞群中分離到一株793B傳染性支氣管炎毒株，命名為TA03株。在前者基礎上，我們開展工作，建立了雞傳染性支氣管炎病毒IBV793BRTPCR檢測方法并進行了初步的應用，同時成功地實現了IBV793BTA03株S1基因的克隆與表達。根據GENBANK已發表的雞傳染性支氣管炎病毒IBV793BS1基因序列，設計一對引物，擴增891BP特異性核酸片段，建立了檢測IBV793B的RTPCR方法。特異性試驗結果表明，793B傳支病毒能擴增出891BP的核酸片段，而IBVM41、H120、H52毒株以及新城疫病毒NDV、禽流感病毒AIV、傳染性法氏囊病毒IBDV無特異性條帶出現。敏感性試驗結果表明，該方法的最低檢出限量為10PG的模板。表明本試驗所建立的RTPCR方法具有敏感性高、特異性強的特點。利用建立的RTPCR方法對從山東省分離的8株疑似雞IBV793B進行檢測，結果7株為陽性。該方法的建立為IBV793B的診斷及流行病學調查提供了可靠的方法。根據雞傳染性支氣管炎病毒IBV793BS1基因序列，設計和合成兩對引物，以TA03株IBV病毒RNA為模板，通過RTPCR擴增出S1蛋白基因的兩個部分重疊片段，分別將其插入表達性載體PGEX6P1中，PCR、酶切鑒定和序列測定后，轉化大腸桿菌BL21DE3，IPTG誘導表達，進行聚丙烯酰胺凝脈電泳和WESTERNBLOTTING試驗。結果表明表達的融合蛋白產物大小均與預期的60KDA大體相符，而且表達的蛋白質具有免疫學活性。

簡介：西北農林科技大學碩士學位論文羊促乳素單克隆抗體的制備和鑒定姓名于秋麗申請學位級別碩士專業臨床獸醫學指導教師馬保華20080501是SP／20和脾細胞融合產生的雜交瘤細胞。雜交瘤細胞株凍存5個月后復蘇培養，連續傳代16代后，仍具有穩定地的分泌抗體的能力。關鍵詞促乳素；細胞融合；間接EUSA雜交瘤細胞；單克隆抗體

簡介：浙江理工大學碩士學位論文家蠶膜蛋白BMOBP2的分離純化及結晶條件初探浙江理工大學學位論文獨創性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經發表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得浙江理工大學或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均己在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名幽糾墓瞧簽字日期2012年12月13日家蠶膜蛋白BMOBP2的分離純化及結晶條件初探本研究由國家高技術研究發展計劃“863“項目2011AAL00603；重大新藥創制科技重大專項企業孵化基地建2012ZX09401009提供資助